8月，北京大學第一醫院介入血管外科鄒英華教授團隊、楊敏副教授團隊和血液內科李淵副教授團隊合作，在干細胞治療下肢缺血性疾病的研究中取得了新進展。研究通過誘導干細胞分化為內皮樣細胞，驗證了該誘導體系在調控血管形成中的作用，進而在小鼠模型上評價了誘導后的內皮樣細胞在治療下肢缺血性疾病中的效果。研究結果《Bone Marrow Mesenchymal Stem Cell-derived Endothelial cells Increase Capillary Density and Accelerate Angiogenesis in Mouse Hindlimb Ischemia Model》以論著的形式發表在干細胞領域知名雜志《Stem cell research & therapy》(Q1區，IF：5.116)。
      下肢缺血性疾病通常由動脈粥樣硬化引起，造成下肢血管狹窄、閉塞，血供減少，隨著人口老齡化進程近年來發病率不斷增高。其中重度肢體缺血(Critical limb ischemia，CLI)是下肢缺血性疾病的嚴重階段，患者往往需要截肢，生活質量差、死亡率高、加重了社會經濟負擔。隨著醫學技術的進步，下肢缺血性疾病的治療從傳統的藥物治療、外科治療，到微創介入腔內治療，這些治療手段讓眾多下肢缺血患者恢復了正常血供、癥狀得到明顯改善。但是對于下肢血管廣泛受累、彌漫性狹窄、閉塞的CLI患者，由于血管病變廣泛、膝下流出道不好，無論外科搭橋還是介入腔內成形治療均無法獲得良好效果，嚴重肢體缺血患者預后極差，1年的死亡率高達25%，截肢率高達30%，而無截肢生存率僅為45%，最終大多數患者仍然無法避免截肢。對于這類疾病，治療性血管新生成為患者最后的希望，其中骨髓來源間充質干細胞移植已經被嘗試用于促進下肢血管新生、血流灌注、組織功能恢復。其機制可能是間充質干細胞的旁分泌功能、多向分化能力、免疫逃避效應。然而缺血部位的局部缺血缺氧微環境使移植后的細胞存活率降低，植入的干細胞難以在體內大量分化為內皮細胞進行血管重塑，從而限制了其治療效果。因此，提高移植細胞在缺血缺氧組織中的存活、分化能力，增加局部組織生長因子分泌量，促進新生血管形成，是目前提高間充質干細胞治療缺血性疾病療效亟待解決的主要問題。

　　該院介入血管外科鄒英華教授、楊敏副教授和血液內科李淵副教授合作，將骨髓來源間充質干細胞在體外建立的誘導平臺上進行短期誘導，獲得內皮樣細胞，研究誘導前后其細胞性質及功能等變化;之后移植于小鼠下肢缺血模型進行驗證并評價其治療效果，觀察其促進血管新生能力、增加患肢血液灌注能力、體內存活能力等在誘導前后的變化;并通過使用轉基因EGFP熒光小鼠，應用免疫熒光技術首次直觀示蹤移植細胞在小鼠體內生成血管的過程，以期為下肢缺血性疾病的再生醫學研究提供種子細胞。

      注射間充質干細胞28天后兩組的免疫熒光結果。間充質干細胞治療組未見EGFP+細胞(A)，而誘導后內皮細胞治療組中大血管上可見明顯綠色熒光(B)

      治療后28天各組蘇木素-伊紅染色以及免疫組化結果
　　該研究由介入血管外科和血液內科合作完成。自2018年以來，李淵副教授課題組采用多種細胞因子聯合誘導的雞尾酒方法，建立了高效穩定的誘導體系，可將人骨髓來源間充質干細胞誘導分化成為內皮樣細胞，誘導效率高達60%～70%。此誘導方法已申請國家發明專利，申請號201910123952.5，現已進入公示實審階段。應用基于Illumina Hiseq 4000平臺的轉錄組測序技術，全面系統地分析骨髓間充質干細胞向內皮細胞誘導分化后基因表達的變化情況，對這些基因的功能、所涉及的信號通路進行分類匯總，從而得到涉及細胞外基質形成、重建和血管生成過程差異基因，此部分研究成果已有2篇論著正式發表于國際血管外科頂級雜志《European Journal of Vascular and Endovascular Surgery》(Q1區，IF：5.328)，題目分別為《RNA-Seq Based Transcriptome Analysis of Endothelial Differentiation of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells》、《Efficient Differentiation of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells into Endothelial Cells in Vitro》，鄒英華教授和李淵副教授為共同通訊作者。
　　該系列研究首次闡明骨髓間充質干細胞向內皮細胞分化的分子調控機制，并首次發現應用干細胞治療血管新生性疾病的調控新靶點，為骨髓來源間充質干細胞分化的內皮樣細胞的促血管新生作用提供了新依據，為大規模應用誘導的內皮樣細胞開展臨床研究打下基礎。此外，本研究應用新發現的調控血管形成的新基因未修飾/修飾的間充質干細胞及不同分化階段的內皮細胞治療小鼠下肢缺血，確定其在轉化醫學中的應用前景。該系列研究從基礎研究轉化到臨床應用，針對血管新生相關的一系列疾病提出新的治療靶點及治療方法，以推動相關學科的發展。
　　該系列研究獲得2018年及2019年北京大學臨床醫學+X青年專項基金(兩年連續資助100萬元)、2019年獲批國家自然科學基金面上項目(81970410)、北京市自然科學基金面上項目(7202203)等多項基金，目前已累積獲批科研基金240余萬元。
　　學科交叉研究在創新研究中有一定優勢，介入血管外科和血液內科長期合作，發揮各自優勢，未來將繼續探索，在血管新生性疾病的再生醫學領域取得更多成果。